أداة تحليل الشظايا

لاستخراج مزيج من شظايا الحمض النووي ، ضع من خلال أداة PCR للقيام بتنقية بسيطة. قم بإزالة النيوكليوتيدات المفردة الفلورية المجانية DDNTP ، تاركًا جزءًا من الحمض النووي بطول معين ، والذي يمكن تسلسله على الجهاز. يتم حقن محلول polyacrylamide أولاً في الشعيرات الدموية المجوفة أثناء عملية التسلسل. ثم ، تم تأين محلول بولي أكريلاميد عن طريق تشعيع ضوء الأشعة فوق البنفسجية لتوليد تفاعل البلمرة. ينتج جل بولي أكريلاميد تأثير فصل تحت المجال الكهربائي لبدء الكهربائي من النوكليوتيدات. الحركة الكهربية لشظايا الحمض النووي القصيرة سريعة ، والحركة الكهربية لشظايا الحمض النووي الطويلة بطيئة. ينتقل مزيج شظايا الحمض النووي من شحنة سالبة إلى شحنة إيجابية تحت عمل حقل كهربائي في شعري يحتوي على هلام بولي أكريلاميد. يتم تشعيع الطرف الإيجابي من الشعيرات الدموية مع ليزر الحالة الصلبة ، ويسجل المستشعر البصري الطيفي شدة التألق المختلفة. كل جزء من الحمض النووي ، عند المرور عبر نقطة مسح الليزر ، يحتوي على مجموعة الفلورسنت عليها ، والتي ستنبعث منها لونًا محددًا.

لأنه في عملية تفاعل البلمرة السابقة ، تبدأ نقطة انطلاق تفاعل البلمرة من موضع التمهيدي المحدد. لذلك ، فإن جزء الحمض النووي الذي يصل إلى نقطة مسح الليزر في الكهربائي أولاً هو الشظية الأقصر ، وبالتالي فإن وضع إنهاء البلمرة سيكون أقرب إلى موضع بداية البلمرة. لذلك ، يعكس لون الفلورسنت أي من القواعد الموجودة في نهاية 3 'هي A و T و C و G.

وعلى العكس من ذلك ، فإن أبطأ شظايا الحمض النووي يصل إلى نقطة مسح الليزر ، وكلما طالت شظايا الحمض النووي. نتيجة لذلك ، يكون موقع الإنهاء الخاص به بعيدًا عن وضع البداية للدعاية. أخيرًا ، يتم الحصول على خريطة لأربعة ألوان.